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[求助] [已解决]显微镜观察96孔板时,细胞在靠近孔边缘的位置出现阴影

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  • TA的每日心情

    2019-10-14 09:00
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    [LV.5]常住居民I

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    发表于 2019-7-2 10:36 | 显示全部楼层 |阅读模式
    在右上角的区域用红笔标出了比较明显的现象

    目前实验发现了以下现象:
    1.孔壁涂黑之后黑影消失;
    2.使用NA=0.38较小的物镜时也没有黑影,NA=0.42的物镜有;

    这种现象是否有理论上的解释?该如何改善?


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    2019-8-7 10:09
    Aex 发表于 2019-8-7 08:29
    1.对涂黑的是板孔侧壁2.目前做实验来看,这个阴影应该还是与孔壁的反射光有关。
    3.外形尺寸限制,目前用 ...



    你使用的照明为阿贝照明,成像面照度不均匀,可以改变照明装置与被测板卡之间间距,这样应该可以避免出现阴影。

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  • TA的每日心情
    擦汗
    2019-9-26 13:51
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    [LV.7]常住居民III

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    发表于 2019-7-2 13:38 | 显示全部楼层
    不清楚你说的黑影是什么,能否在图中标记,还有你说的孔板是指图中黑色的圆孔么(能看到2排)。我现在接触显微镜比较多,也在搭一些成像系统的光路,希望多多交流。
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  • TA的每日心情

    2019-10-14 09:00
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     楼主| 发表于 2019-7-3 09:12 | 显示全部楼层
    冷夜 发表于 2019-7-2 13:38
    不清楚你说的黑影是什么,能否在图中标记,还有你说的孔板是指图中黑色的圆孔么(能看到2排)。我现在接触 ...

    黑影就是图中拿红线画出的地方,目前怀疑是鬼像,还没找到是哪一个面的光线成像了。
    96孔板是细胞实验用的容器,如图,我给的是一个孔内边缘区域出现该现象的采样

    图中的黑色圆形是公司生产的特殊培养板,可以通过电路来计数。

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  • TA的每日心情

    2019-9-27 10:58
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    [LV.4]偶尔看看III

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    发表于 2019-7-13 12:03 | 显示全部楼层
    先染色,在将没有黑点的和有黑点的图片放上来对比,看不清
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  • TA的每日心情

    2019-10-14 09:00
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     楼主| 发表于 2019-7-15 08:46 | 显示全部楼层
    啥时候全息投影 发表于 2019-7-13 12:03
    先染色,在将没有黑点的和有黑点的图片放上来对比,看不清

    对比
    第一张不正常的样子,第二张是正常的样子

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  • TA的每日心情
    开心
    2019-10-10 11:07
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    发表于 2019-7-26 09:33 | 显示全部楼层
    Aex 发表于 2019-7-15 08:46
    对比
    第一张不正常的样子,第二张是正常的样子

    嗯嗯,看到了,有鬼影
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  • TA的每日心情

    2019-10-10 09:53
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    发表于 2019-8-6 10:53 | 显示全部楼层
    冷夜 发表于 2019-7-2 13:38
    不清楚你说的黑影是什么,能否在图中标记,还有你说的孔板是指图中黑色的圆孔么(能看到2排)。我现在接触 ...

    你好,,能加好友向你学习么我最近也一直在折腾显微成像这块
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  • TA的每日心情
    慵懒
    2019-9-20 16:07
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    发表于 2019-8-6 17:43 | 显示全部楼层
    请问涂黑涂的是那个部位?是板孔侧壁吗?NA0.42是否超出景深?
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    2019-10-14 09:00
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     楼主| 发表于 2019-8-7 08:29 | 显示全部楼层
    zidongkong 发表于 2019-8-6 17:43
    请问涂黑涂的是那个部位?是板孔侧壁吗?NA0.42是否超出景深?

    1.对涂黑的是板孔侧壁2.目前做实验来看,这个阴影应该还是与孔壁的反射光有关。
    3.外形尺寸限制,目前用的是一个扩散5度的光源(非柯勒照明),照明光斑略大于一个孔,光斑缩小到一定程度时,阴影就不见了。
    4.跟景深应该无关,对焦不清楚的情况下,依然能看到阴影。

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  • TA的每日心情
    慵懒
    2019-9-20 16:07
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    发表于 2019-8-7 10:09 | 显示全部楼层    本楼为最佳答案   
    Aex 发表于 2019-8-7 08:29
    1.对涂黑的是板孔侧壁2.目前做实验来看,这个阴影应该还是与孔壁的反射光有关。
    3.外形尺寸限制,目前用 ...



    你使用的照明为阿贝照明,成像面照度不均匀,可以改变照明装置与被测板卡之间间距,这样应该可以避免出现阴影。
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